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高中三年级生物

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  • 实验题
    (附加题)利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验。
    (1)实验步骤:
    ①.配制以________为唯一碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是________。
    ②.将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上出现_______。
    ③.将接种针用_______法灭菌后,从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种入______(填“固体”、“半固体”或“液体”)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖。
    ④.配制与①相同的培养基,并加入少量碘液,使培养基呈蓝紫色。用______法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。
    ⑤.培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_______现象的菌落即为初选菌落,经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。
    (2)上述所有倒平板和接种操作,都应在超净台上________附近进行。
    (3)上述实验步骤中,从用途看,①所用培养基属于_________培养基,⑤所用培养基属于________培养基。
    本题信息:2012年模拟题生物实验题难度较难 来源:姚瑶
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本试题 “(附加题)利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验。(1)实验步骤:①...” 主要考查您对

土壤中微生物的分离与计数

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  • 土壤中微生物的分离与计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:

1.分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度.pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法:能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2.统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3.分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
4.实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定


知识拓展:

1、Taq细菌是耐高温的微生物。
2、培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或出去某些营养物质,一直其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
3、测定微生物数量的方法:
①直接计数法:常用显微镜直接技术法,一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
②间接计数法:常用稀释平板计数法,平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。4、通常用来作为菌种鉴定的重要依据的是菌落。
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