显微镜的成像原理:光线→反光镜→遮光器→通光孔→透明标本→物镜(放大成倒立实像)→镜筒→目镜(放大成虚像)→眼
特别提示:显微镜最重要的部分是物镜和目镜,观察标本时,必须使目镜,物镜,通光孔,光圈在一条直线上。
显微镜的使用:
1. 取镜和安放
取镜时右手握住镜臂,左手平托镜座,保持镜体直立,不可歪斜。安放时,动作要轻,一般放在实验台左侧,距实验台边缘7理米左右处。安装物镜或目镜时,镜筒向前,镜臂朝向操作者。用毛巾擦拭机械部分,用擦镜纸擦拭光学部分。
2. 对光①转动粗准焦螺旋(逆时针),使镜筒上升。
②转动转换器:使低倍物镜对准通光孔(物镜前端与载物台保持2厘米距离)。
③转动遮光器:把一个较大的光圈对准通光孔。
④转动反光镜:左眼注视目镜(右眼睁开),使光线通过通光孔反射到镜筒内,直到看到一个白亮的视野
3. 观察①低倍镜的使用
观察任何标本都必须先用低倍镜。
a.放置标本:升高镜筒,把玻片标本放在载物台中央。标本材料正对通光孔的中心,用压片夹压住载玻片的两端。
b.调焦:两眼从侧面注视物镜,转动粗准焦螺旋(顺时针),让镜筒徐徐下降至物镜距玻片2~ 5毫米处。然后用左眼注视目镜.右眼同时睁开(以便绘图),同时用手反方向(逆时针)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。如果不够清楚,可用细准焦螺旋调节(不可以在调焦时边观察边使镜筒下降,以免压碎装片和镜头)。
c.低倍镜的观察:所用的目镜放大倍数与物镜放大倍数相乘所得的积即为原物被放大的倍数。如果物像不在视野中央,要慢慢移动到视野中央,再适当进行调节。
②高倍镜的使用
a.定位目称:先用低倍物镜确定要观察的目标的位置,再将其移至视野中央。转动转换器.把低倍物镜轻轻移开,在原位置小心地换上高倍物镜(操作要卜分仔细,以防镜头碰击玻片)。
b.调焦:正常情况下,当高倍物镜转正之后,在视野中央即可看到模糊的物像,只要沿逆时针方向略微调到细准焦螺旋,即可获得清晰的物像。在换上高倍物镜观察时,视野变小、变暗,要重新调节视野亮度,可通过升高聚光器或利用凹面反光镜来增大。
4. 整理将显微镜的外表擦拭干净,把物镜偏向两旁,取下目镜放进镜头盒,反光镜与水平面垂直,将镜筒下降到最低处,把显微镜放回箱内。
5. 整理(1)在镜筒下降时,眼髓一定要注视物镜,以防物镜碰到玻片而损伤物镜或将玻片标本压碎更换物镜时血转动转换器.不能用手扳着物镜转动。
(2)用显微镜观察时,两只眼睛都要睁开。
(3)显微镜下所看到的像是倒立的(上下颠倒、左右相反、放大的虚像)。所以,玻片的移动方向与物像的移动方向相反。例如,物像偏左上方,则应往左上方移动玻片。
(4)显微镜下物像的放大倍数等于物镜与目镜的放大倍数的乘积。
5. 辨别镜头的放大规格
①目镜:直插式,长度和放大倍数成反比,即目镜越长,放大倍数越小。
②物镜:螺旋式,长度和放大倍数成正比,即物镜越长,放大倍数越大。
6. 迅速判断污点位置的方法:
污点一般会在目镜、物镜或者玻片标本上。首先转动目镜,如果污点不动,则污点不在目镜上;移动玻片标本,污点也不动,则污点肯定在物镜上;若污点在反光镜上则不会在视野中看到。
7. 正确使用准焦螺旋:准焦螺旋有粗细之分。粗准焦螺旋(又称粗调),位于镜臂上方,可以转动,以使镜筒上下移动,转动时镜筒升降的幅度大;细准焦螺旋(又称细调),位于镜臂的下方,它转动时镜筒升降的幅度小。
8. 转动方向和升降方向的关系:顺时针转动准焦螺旋,镜筒下降;反之则上升。
9. 根据需要使用光圈、反光镜以调节视野的亮度①大光圈:光线强,视野亮,光线过弱需要强光时使用。小光圈:光线弱。视野暗,光线过强需要弱光时使用。
②平面镜:反射的光线较弱,光线过强需要弱光时使用。凹面镜:反射的光线较强,光线过弱需要强光时使用。
观察细胞的结构知识梳理:
易错点:
在显微镜的使用中,对光操作上的差错:
在对光前应先使低倍目镜、物镜、通光孔、光圈在一条直线上,根据环境中光线的强弱正确选择光圈的大小和反光镜的平面或凹面。对好光后,通过目镜可看到白亮但不刺眼的视野。
误认为玻片的移动方向与物象的移动方向相同:
由于在显微镜下所看到的是一个倒像,且物像和实际物体上下、左右完全颠倒。所以物像和玻片的移动方向一定相反。如果物像偏右,应向右移动玻片;如果要想让物像向右移动,则需向左移动玻片。
误认为显微镜的放大倍数越大,视野中看到的细胞数目越多:
显微镜的视野大小是不变的,如果放大倍数增大,视野中看到的细胞体积增大,原来视野边缘的细胞就到了视野之外,细胞数目就一定比原来少了。
植物细胞的基本结构:
图为植物细胞的结构模式图,植物细胞的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核。
植物细胞组成部分的功能:
1.细胞壁:细胞壁是植物细胞的显著特征之一,包围在植物细胞最外面,它的主要功能是对细胞膜及其以内结构起支持、保护的作用,细胞壁的成分是纤维素,比较“坚硬”。
2.细胞膜:细胞膜是一层极薄的膜,它紧贴细胞壁,在正常的情况下很难用光学显微镜观察到。细胞膜的化学成分是蛋白质和脂质,细胞膜有以下功能:
①控制物质的进出;
②接受、传递外界信号;
③抵御病菌侵入等。
3.细胞质:
细胞质是存在于细胞膜以内细胞核以外的、液态的、可以流动的物质。细胞质内有多种结构;
①液泡:在幼小的植物细胞内,液泡小而分散,在成熟植物细胞内,只有一个大的中央液泡,可占细胞体积的90%以下,液泡内充满了细胞液,细胞液的主要成分是水,此外还溶解着多种物质,如糖、有机酸、蛋白质等,有的液泡还含有色素,使细胞显现不同的颜色。液泡的功能主要是渗透调节、储藏、消化三方面。
②叶绿体:细胞质中一牡绿色小颗粒,是植物进行光合作用的场所。叶绿体含有叶绿素,故含叶绿体的细胞大多呈绿色,一些果实在成熟过程中,叶绿体可转变为有色体,使果实呈现各种颜色。
③线粒体:是细胞呼吸的场所,很小,在普通光学显微镜下难以观察到。
4.细胞核:细胞核是细胞重要的组成部分,在幼小的植物细胞中,细胞核较大,呈圆球形,位于细胞中央,随着细胞的生长和中央液泡的形成,细胞核移到靠近细胞壁的部位,呈半球形或圆形。细胞核的功能主要是储存和传递遗传信息。
常见生物玻片标本种类和制作过程:
材料 |
种类 |
制作 |
生物材料,载玻片(长方形),盖玻片(正方形 |
切片 |
切片是用从生物体上直接切取的薄片制成的,可用切片机切取或用徒手切片法切取 |
涂片 |
用涂抹的方法,将动植物较为疏松的组织或游离的细胞均匀地散布在载玻片上 |
装片 |
用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成,或直接用个体微小的生物制成 |
特别提醒:①制作三种玻片的共同要求是所观察材料必须是薄而透明的,最好是一层细胞,特别微小的生物可直接做成玻片标本。
②三种玻片按保存时间的长短可分为临时和永久两大类。
③染色剂对细胞具有毒害作用,因此,制作生物玻片时尽量不染色,在材料各结构对比度较弱的情况下尽量使用毒害作用较小的染色剂。
洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作:(1)擦:用洁净的纱布吧载玻片和盖玻片擦拭干净
(2)滴:把载玻片放在试验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水制作临时装片
(3)撕:用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取内表皮,把其浸入载玻片上的水滴中,用镊子展平
(4)盖:用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓放下,盖在要观察的材料上,避免出现气泡。
(5)染:滴一滴碘液在盖玻片的一侧,用吸水纸从盖玻片的令一侧吸引,使染液浸润标本的全部。
特别提醒:
①去除装片中气泡的方法:可用滴水引流法或镊子挤压法去除气泡。
②区分细胞和气泡:气泡在视野中是圆形或椭圆形,有黑而粗的边缘,用镊子或解剖针按压盖玻片。气泡会变形、移动,而植物细胞不会变形,也不会移动。
切片,涂片,装片的辨析:
用显微镜观察生物标本时要先做成玻片。生物玻片根据制作方法可分为切片、涂片、装片三种,这三种玻片根据保存时间长短不同可分为两类,即永久性的和临时性的。它们的相同之处是被观察的材料必须簿而透明,生物玻片无论从概念上还是从制作上都比较易混淆,需注意区分。
流动的组织——血液新鲜的血液加入抗凝剂(柠檬酸钠),静置一段时间,会出现分层的现象。上面淡黄色的半透明液体是血浆,约占55%,下面暗红色不透明的是红细胞,约占45%。中间薄薄的一层白色物质是白细胞和血小板,不到1%。
特别提示:不加抗凝剂的血液很快就会凝成血块,在凝血块周围出现的淡黄色的透明液体是血清。血清和血液的主要区别是血清中不含纤维蛋白原(能使血液凝固的物质)。
血浆:
(1)成分:主要成分是水,占91%~92%。血浆中含有多种维持人体生命活动所必需的营养物质。如蛋白质、葡萄糖、无机盐等。另外血浆中还含有一些体内产生的废物。如:二氧化碳、尿素等。
(2)功能:运载血细胞,运输养料和废物。
血细胞:血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
血液的功能:
运输氧气及少量的二氧化碳,运输营养物质和废物,起防御保护作用,调节体温。
静脉血和动脉血:
主要根据血液中含氧量的多少来区分。当血红蛋白与氧气结合时,血液中含氧量高,呈鲜红色,此时的血叫动脉血;当血红蛋白与氧气分离后,血液中含氧量低,呈暗红色,此时的血叫静脉血。
动脉血和静脉血的主要区别是含氧量的多少和颜色的差别,与在什么血管中流动无关。
三种血细胞的比较:
比较项目 |
红细胞(RBC) |
白细胞(WBC) |
血小板(PLT) |
形态结构 |
个体小,呈两面凹的圆饼状,成熟的红细胞无细胞核 |
比红细胞大,有细胞核 |
个体最小,形状不规则,无细胞核 |
功能 |
运输氧气和部分二氧化碳 |
对人体起防御和保护作用,能吞噬侵入人体的病菌 |
促进止血和加速凝血 |
正常值 |
男:(4.0——5.5)×1012个/升 女:(3.5——5.0)×1012个/升 |
(4——10)×109个/升 |
(100~300)×109个/升 |
异常情况 |
人体在运动、饱食、缺氧等情况下,红细胞数会暂时增加。血液中的红细胞数量过少,会患贫血 |
过多,表明身体有炎症 |
过少,机体会异常出血;过多,易形成血栓 |
①红细胞里含有一一种红色含铁的蛋白质,即血红蛋白(Hb),它的特性是在氧含量高的地方容易与氧气结合,在氧含量低的地方又容易与氧气分离。血红蛋白的这一特性,使红细胞具有运输氧气的功能,它在成年男子体内的含量是120~160克/升,成年女子体内的含量是110~150克/升。如果血红蛋白的数量过低,同样也会引起贫血,一般贫血的人可以注意多吃一些含蛋白质和铁丰富的食物
②白细胞在血液中体积最大.但能变形。所以能穿过毛细血管壁进入组织细胞间隙,吞噬侵入人体的病菌后,自己也会死亡,如伤口流出的脓液主要是由死亡的白细胞和病菌组成的。当人体内有炎症时,白细胞的数量会增加,临床上常以此作为判断体内是否有炎症的依据。
③自然止血:皮肤划破后流血,但不久就会自然止血,这是因为皮肤的血管受损后,血液中的血小板在伤口处聚集,释放与血液凝固有关的物质,形成凝血块堵塞伤口而止血。
易错点:1. 误认为动脉瓣位于动脉中
血液不能倒流的原因主要是在心房与心室之间有房室瓣、心室与动脉之间有动脉瓣,除此之外,在四肢静脉中还有静脉瓣。其他血管内则没有瓣膜。
2. 误认为动脉里流的一定是动脉血,静脉里流的一定是静脉血
(1)动脉和静脉是血管名称,动脉血和静脉血是血液名称,与血管名称无关。
(2)动脉血和静脉血是以血液中含氧量的多少和颜色的深浅来划分的,含氧多、颜色鲜红的血叫动脉血,含氧少、颜色暗红的血叫静脉血。
(3)动脉血和静脉血与血液中所含养料或废物的多少无关。
人体内物质的运输知识梳理:
血管分类:血管分为动脉、静脉和毛细血管三种。
三种血管的比较:
类别 |
概念 |
结构 |
管内血流速度 |
分布 |
功能 |
管壁特点 |
管腔大小 |
动脉 |
将血液从心脏输送到身体各部分去的血管 |
较厚、弹性大 |
较大 |
最快 |
一般分布在身体较深的部位 |
将血液从心脏输送到全身备部分 |
静脉 |
将血液从身体各部分送回到心脏的血管 |
较薄、弹性小 |
大 |
慢 |
比较大的与动脉并行,般分布在身体比较浅的部位 |
将血液从身体各部分送叫心脏 |
毛细血管 |
连通于最小的动脉和静脉之间的血管 |
非常薄,仅由一层上皮细胞构成 |
极小,仅能允许红细胞单行通过 |
极慢 |
分布广泛,遍布全身各器官 |
便于血液与组织细胞之间进行物质交换 |
血管出血时的症状及止血方法:动脉出血时颜色鲜红,血流猛急,呈喷射状。止血时一般在受伤动脉的近心端,采用指压止血法或止血带止血法进行止血。
静脉出血对血色暗红,血流较缓和,一般是将受伤静脉的远心端压住而止血。
毛细血管出血时血液呈红色,慢慢渗出,血量少,一般会由于血液凝固而自然止血。处理时可先时伤口进行消毒。再用消毒纱布包扎。
血管的判断方法:
判断动脉、静脉、毛细血管的方法:红细胞单行通过的血管为毛细血管;动脉与静脉之间相连的最细小血管是毛细血管。根据血流的方向,血液由大血管分散流向小血管。这样的血管是动脉;血液由小的血管汇集流往大的血管,这样的血管为静脉。