探究影响酶活性的条件：

一、探究温度对酶活性的影响：
1、实验目的：
（1）初步学会探索温度和pH对酶活性的影响的方法。
（2）探索淀粉酶在不同温度和pH下催化淀粉水解的情况。
2、实验原理：
（1）淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
（2）淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注：市售a-淀粉酶的最适温度约60℃
3、方法步骤：

序号	加入试剂或处理方法	试管
		A	B	C	a	b	c
1	可溶性淀粉溶液	2mL	2mL	2mL	/	/	/
	新鲜淀粉酶溶液	/	/	/	1mL	1mL	1mL
2	保温5min	60℃	100℃	0℃	60℃	100℃	0℃
3	将a液加入到A试管， b液加入到B试管， c液加入到C试管中，摇匀
4	保温5min
5	滴入碘液，摇匀	60℃	100℃	0℃
6	观察现象并记录

二、不同pH值对酶活性的影响（原理、目的参照温度的相关内容）
1、实验步骤：

序号	加入试剂或处理方法	试管
		1	2	3
1	注入新鲜的淀粉酶溶液	1mL	1mL	1mL
2	注入蒸馏水	1mL	/	/
3	注入氢氧化钠溶液	/	1mL	/
4	注入盐酸	/	/	1mL
5	注入可溶性淀粉溶液	2mL	2mL	2mL
6	60℃水浴保温5min
7	加入斐林试剂，边加边振荡	2mL	2mL	2mL
8	水浴加热煮沸1min
9	观察3支试管中溶液颜色变化边记录

2、实验结论：影响酶活性的因素有温度和PH值有关。

易错点拨：

1、在酶的最适pH探究实验中，操作时必须先将酶置于不同环境条件下（加清水、加氢氧化钠、加盐酸），然后再加入反应物。不能把酶加入反应物在酶的作用下先发生水解。
2、在酶的最适温度探究实验中，酶溶液和反应物混合之前，需要把两者先分别放在各自所需温度下保温一段时间。若选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度，检测的试剂宜先用碘液，不应该选用斐林试剂。因选用斐林试剂需热水浴加热，而该实验中需严格控制温度。

探究酵母菌的呼吸方式：

一．实验原理：
（1）酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。
方程式：有氧呼吸：C₆H₁₂O₆+6H₂O+O₂6CO₂+12H₂O+能量；无氧呼吸： C₆H₁₂O₆2C₂H₅OH+2CO₂+能量
（2）CO₂可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO₂的产生情况。
（3）橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。
实验装置：

二．方法步骤：
提出问题→作出假设→设计实验→（包括选择实验材料．选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）→实施实验→分析与结论→表达与交流。
（1）酵母菌培养液的配制
取20g新鲜的食用酵母菌，分成两等份，分别放入锥形瓶A（500mL）和锥形瓶B（500mL）中 ，再分别向瓶中注入240mL质量分数为5%的葡萄糖溶液
（2）检测CO₂的产生
用锥形瓶和其他材料用具组装好实验装置（如上图），并连通橡皮球（或气泵），让空气间断而持续地依次通过3个锥形瓶(约50min)。然后将实验装置放到25-35℃的环境中培养8-10h。
（3）检测洒精的产生
各取2mL酵母菌培养液的滤液，分别注入2支干净的试管中。向试管中分别滴加0.5mL溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（体积分数为95%-97%）并轻轻振荡，使它们混合均匀，观察试管中溶液的颜色变化。
三．实验现象及分析
(1)现象：甲、乙装置中石灰水都变混浊，装置甲混浊快且程度高。装置乙中的B溶液由橙色变成灰绿色，装置甲中的A溶液不变色。
(2)分析：①酵母菌有氧和无氧条件下都产生 CO2；②酵母菌在有氧比无氧时放出的CO2多且快； ③无氧时酵母菌分解葡萄糖产生酒精。
(3)实验结论：酵母菌在有氧和无氧条件下都能进行细胞呼吸。在有氧条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生大量的二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生酒精，还产生少量的二氧化碳。

知识点拨：

1、将装置甲连通橡皮球，让空气间断而持续地依次通过3个锥形瓶，既保证O2的充分供应，又使进入A瓶的空气先经过含NaOH溶液的锥形瓶，洗除空气中的CO2，保证第三个锥形瓶的澄清石灰水变混浊是由于酵母菌有氧呼吸产生CO2所致。
2、装置乙中，B瓶应封门放置一段时间后，待酵母菌将B瓶中的氧消耗完，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶。

一、实验原理
（1）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。
（2）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。
二、探究问题
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
三、作出假设：在有限的环境条件下，酵母菌种群的数量随时间呈什么型增长变化。
四、材料用具
酵母菌菌种，无菌马铃薯培养液或肉汤培养液，无菌水，试管，棉塞，恒温培养箱，显微镜，无菌滴管，无菌移液管，小烧杯或小试管，血球计数板（2mm×2mm）、纱布、滤纸、镊子、盖玻片等。五、探究思路
怎样进行酵母菌的计数。对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。盖玻片下，培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×10⁴x(x为小方格内酵母菌数)