本试题 “猪笼草是一种食虫植物,为了验证猪笼草分泌液中有蛋白酶。某学生设计了两组实验,如下图所示。在35℃水浴中保温一段时间后,甲、乙试管中加入适量的双缩脲试剂...” 主要考查您对实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
酶的本质与特性
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生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测方法:
1、检测原理:
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。
(1)糖类
(2)脂肪
(3)蛋白质
2、检测步骤
(1)还原糖的检测与观察:
(2)脂肪的检测:
方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色
方法二:
(3)蛋白质的检测:
(4)淀粉的检测与观察:
斐林试剂 | 双缩脲试剂 | |
鉴定成分 | 还原糖 | 蛋白质 |
鉴定原理 | 还原糖中的醛基(-CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu.0沉淀 | 双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性溶液中能与Cuz+结合生成紫色络合物,蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键 |
试剂浓度 | 甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 | A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液;B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 |
使用方法 | 甲液、乙液混合均匀后,再加入样液 | 先加A液造成碱性环境,再滴加B液 |
使用条件 | 加热 | 不加热 |
实验现象 | 浅蓝色一棕色—砖红色 | 紫色 |
注意事项:
还原糖的检测和观察:
①还原糖有葡萄糖,果糖,麦芽糖;
②甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用;
③必须用水浴加热
脂肪的鉴定:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
②酒精的作用是:洗去浮色
③需使用显微镜观察
④使用不同的染色剂染色时间不同
蛋白质的鉴定:
①先加A液1ml,再加B液4滴
②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比
时间 | 发现者 | 实验过程及现象 | 实验结论 |
1773年 | 意大利科学家斯帕兰札尼 | 将装有肉块的小金属笼子让鹰吞下,一段时间后取出,发现笼内的肉块不见了 | 说明胃具有化学性消化的作用 |
1836年 | 德国科学家施旺 | 从胃液中提取出了消化蛋白质的物质 | 这就是胃蛋白酶 |
1926年 | 美国科学家萨姆纳 | 从刀豆种子中提取出脲酶的结晶,并进行了证明脲酶是蛋白质的化学实验 | 证明脲酶是一种蛋白质 |
20世纪30年代 | 许多科学家 | 提取多种酶的蛋白质结晶 | 酶是一类具有生物催化作用的蛋白质 |
20世纪 80年代 | 美国科学家切赫和奥特曼 | 少数RNA也具有生物催化功能 | 少数的酶是RNA |
化学本质 | 绝大多数是蛋白质 | 少数是RNA |
合成原料 | 氨基酸 | 核糖核苷酸 |
合成场所 | 核糖体 | 细胞核(真核生物)(主要) |
来源 | 一般来说,活细胞都能产生酶 |
1、酶的作用和特性的实验探究:
1.酶的催化作用实验探究对照组:反应物+清水检测反应物不被分解;实验组:反应物+等量的相应酶溶液检测反应物被分解。
2.酶的专一性实验搽究此实验中的自变量可以是不同反应物,也可以是不同酶溶液,因变量是反应物是否被分解。
(1)设计思路一:换反应物不换酶
实验组:反应物+相应酶溶液检测反应物被分解;
对照组:另一反应物+等量相同酶溶液检测反应物不被分解。
(2)设计思路二:换酶不换反应物
实验组:反应物+相应酶溶液检测反应物被分解;
对照组:相同反应物+等量另一种酶溶液检测反应物不被分解。
3.酶的高效性实验探究
对照组:反应物+无机催化剂检测底物分解速率;
实验组:反应物+等量酶溶液检测底物分解速率。
实验中自变量是无机催化剂和酶,因变量是底物分解速率。
4.酶作用的适宜条件的探究
(1)最适温度的探究实验原理
①淀粉+淀粉酶——麦芽糖;麦芽糖+斐林试剂—一产生砖红色沉淀;淀粉+碘——蓝色。
②温度影响淀粉酶活性,从而影响淀粉的分解,滴加碘液后,根据蓝色深浅来判断淀粉分解状况,进而推断出酶活性变化。
(2)最适pH的探究实验原理
①2H202+过氧化氢酶——2H2O+O2
②pH影响酶的活性,从而影响氧气的生成速度,可用点燃但无火焰的卫生香燃烧的情况来检验氧气生成速度的快慢。
(3)实验探究思路
①最适温度的探究思路
②最适pH的探究思路
2、易错点拨:
(1)在酶的最适pH探究实验中,操作时必须先将酶置于不同环境条件下(加清水、加氢氧化钠、加盐酸),然后再加入反应物。不能把酶加入反应物在酶的作用下先发生水解。
(2)在酶的最适温度探究实验中,酶溶液和反应物混合之前,需要把两者先分别放在各自所需温度下保温一段时间。若选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度,检测的试剂宜先用碘液,不应该选用斐林试剂。因选用斐林试剂需热水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
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